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顯微鏡維修的原理
顯微鏡維修是用人眼不可見的一定波長的紫外線作光源照射被檢物體,使之受激發后而產生人眼可見的,然后再經顯微鏡維修成像系統放大來進行鏡檢。顯微術是生物,學中的重要研究手段,如對生物組織、生理、病理、微生物、藥、食品、化學等諸方面的鑒定等。
FR-2L三目落射顯微鏡維修一、
普通光是由發光體質點的熱運動所引起的輻射;而是非溫度輻射,是一種冷光。有多種,如光化(由光源激發而產生的),放射出(由放射性物質激發而產生的)。生物(如磷的氧化時發出的),等等。而顯微鏡維修則是利用光化這原理設計制造,達到顯微術鏡檢的目的。
由于顯微鏡維修的光源是利用人眼不可見的短波光,因而就大大提高了物鏡的分辨率,圖像與背景的反差亦甚為明顯。
現象
將物體放到光譜中的各域,就可發現引起有效的光線是光譜上波長較短的區域,即近紫外線區域,波長約為320-400nm。這種現象的實質是分子吸收了短光的能量(波長越短,光能越強),又以發光的形式以波長較長和射出,而為人眼可見,這就是現象。接近可見光的紅光端,大部分的現象是符合這一規律的。
現象可分為兩種:
一次現象;又稱固有或自發,當經紫外線的照射后,就能發出的物質;
二次現象:又稱激發,當經紫外線照射后不能或只部分發生微弱的,這樣就需先用素處理,再經紫外線照射才能發生,這是因組織內吸附或溶解有素的緣故。
顯微鏡維修的原理
濾色塊是顯微鏡維修的重要部位,其核心部件由激發光濾色片(first barrier filter)、發射光濾色片(second barrier filter)和半透半反濾色片(beam-splitting mirror)組成。
激發光濾色片及發射光濾色片:根據光源和色素的特點,通常選用以下三類配套,提供一定波長范圍的激發光,并使樣品激發出的透過,到達目鏡成像。
紫外光激發:激發光濾色片可使紫外光透過,阻擋400nm以上的可見光通過。與之相應的發射光濾色片可允許藍光通過,視野內的光呈藍色,如應用于DAPI染色。
藍光激發:激發光濾色片可使藍光通過,阻擋其他波段的光。與之相應的發射光濾色片可允許綠光通過,如GFP染色標記。
綠光激發:激發光濾色片使綠光通過,阻擋其他波段的光。與之相應的發射光濾色片通常可允許紅光通過,如Rhodamine染色。
半透半反濾色片:它的作用是完全阻擋激發光通過,而將其反射;并透過相應波長范圍的發射光。其型號與激發光濾色片和發射光濾色片相對應。
光路:光線在濾色塊中的傳播光路為:反射光濾光片只允許光源中特定波長的光線透過,這部分激發光到達半透半返濾色片時被反射后通過物鏡照射到樣品上,樣品中的基團被激發光激發,發射出長波長的;發射光通過物鏡,透過半透半反濾色片,到達發射光濾色片,此時又只有特定波長的光線透過,后通過目鏡被我們肉眼看到的就是樣品中的了。金相顯微鏡維修目鏡和物鏡的安裝步驟
金相顯微鏡維修的光學系統與機械部件,在出廠前已經裝配成一部完整的光學儀器。但其中某光學部件(如目鏡、物鏡、攝影裝置等)由于保管上的需要(如為了防琢、防塵、防展等》,平時存放在專門的設備中集中保管,到使用時才把這些光學部件安裝在顯微鏡維修上。顯微鏡維修使用完畢,又孺將這些光學部件從顯微鏡維修架身上拆卸下來,放回專門的保管設備中。由此可見,一部金相顯微鏡維修在使用過程中,是要經常安裝和拆卸某些光學部件的。本節就這些問題討論一下應注意的事項。使用顯徽鏡前,必須安裝好目鏡和物鏡。
目鏡的安裝
目鏡的安裝比較簡單:先把目鏡簡上的塑料防塵蓋子取下,然后自目鏡筒上端插入選擇好的目鏡就可以了。若要更換放大倍數不同的目鏡,僅需把原來已安裝好的目鏡從鏡筒中拔出,然后把要用的目鏡擂入目鏡筒中即可,但要注意目鏡是否已和目鏡筒的支承面完全重合。